Klasyczna chromatografia kolumn
2. kolumna chromatograficzna (typ obrotu)
3. kolumna chromatograficzna (manualna)
*** CENUT CENY Powyższy, zapytaj nas, abyśmy otrzymali
Opis
Parametry techniczne
Klasyczna chromatografia kolumnjest fundamentalną techniką separacji powszechnie stosowaną w chemii i biochemii do oczyszczania i izolowania komponentów z mieszanin . działa na zasadzie różnicowego partycjonowania substancji między fazą stacjonarną spakowaną w kolumnie a fazą mobilną, która przepływa przez nią .
Faza stacjonarna, zazwyczaj solidna adsorbent, taki jak żel krzemionkowy lub glin, jest szczelnie zapakowana w szklaną lub plastikową kolumnę . Próbka wprowadzana jest na górze kolumny, a następnie dodanie fazy mobilnej rozpuszczalnika lub mieszanki rozpuszczalników ., faza mobilna w dół kolumny, komponenty z mieszanki w fazie witryny witrynicznej z witryną rozpuszczalników lub mieszanki rozpuszczalników lub mieszanki SPRASE Na podstawie ich właściwości chemicznych, takich jak polaryzacja, rozmiar i powinowactwo do adsorbent .
Związki z silniejszymi interakcjami z fazą stacjonarną poruszają się wolniej przez kolumnę, podczas gdy te ze słabszymi interakcjami podróżują szybciej . Ta różnicowa migracja powoduje podział mieszanki na odrębne pasma lub frakcje, które można zbierać indywidualnie .}
Jest ceniony ze względu na swoją prostotę, wszechstronność i opłacalność . Jest odpowiedni dla zarówno separacji analitycznych, do identyfikacji i kwantyfikacji komponentów, a separacje na skalę preparatywną, w celu uzyskania większych ilości oczyszczonej substancji . pomimo uzupełnień większej liczby zaawansowanych technicznych technik aplikacji .
Parametry
Podstawowe zasady
|
|
Klasyczna chromatografia kolumn, znany również jako chromatografia ciekłokrotno-stowarzyszona, jest techniką oddzielenia substancji rozpuszczonych na podstawie różnicy w rozkładu między fazą stacjonarną (zwykle stałym adsorbentem) a fazą ruchomą (rozpuszczalnik) . Podstawowa zasada można podsumować w następujący sposób: Za pomocą stałej fazy, rozpuszczanie rozwiązania jest adsorbowane, a następnie komponentami mieszanki można podsumować w sposób dyskretyczny przez komponenty w dyskrecie. różne współczynniki rozkładu między fazą stałą a fazą mobilną . W chromatografii kolumnowej faza stacjonarna składa się zwykle z porowatych cząstek stałych (takich jak żel krzemionkowy, tlenktyw, węgiel aktywowany itp. .), który ma dużą powierzchnię właściwą i centrum adsorpcji, i może tworzyć wiązania wodorowe z moczami rozpuszczalnymi molekułami, siły van der i innymi interakcjami, wynikającymi z adsorpcji. fazy mobilnej dla elusy. Cząsteczki substancji rozpuszczonej z fazy stacjonarnej, a jej selekcja należy określić zgodnie z polarnością substancji rozpuszczonej i charakterystyk adsorpcji adsorbentu . W procesie separacji roztwór mieszanki jest wprowadzany do kolumny zawierającej fazę stacjonarną . z przepływem fazy mobilnej, komponenty przesuwają się w dół kolumny z różnymi prędkościami ze względu na różną zdolność adsorpcji fazy stacjonarnej . bardziej polarne komponenty są zwykle łatwe do uzupełnienia adsorbowanego przez fazę stacjonarną, więc poruszają się powoli.}}}} bardziej komponentów komponentów są łatwe komponenty są łatwe do uzupełnienia. Z słabą polaryzacją jest łatwo poruszony przez fazę mobilną, a prędkość ruchomej jest szybsza . W ten sposób każdy komponent tworzy szereg pasm kolorów na kolumnie, aby osiągnąć separację . |
Analiza aminokwasów
Analiza aminokwasów jest zwykle wykonywana przy użyciu chromatografii cieczowej, z którejKlasyczna chromatografia kolumnjest powszechnie stosowaną techniką . W tej metodzie, żywica wymiany jonowej jest używana jako faza stacjonarna do oddzielania aminokwasów zgodnie z różnicą ładunku elektrycznego . aminokwasów może być konieczne przekształcenie w bardziej wykrywalną postać przez pochodną i pochodną. kolumna .
- Przygotowanie próbki: Próbka białka jest hydrolizowana do aminokwasów . Można to osiągnąć za pomocą hydrolizy kwasowej lub hydrolizy enzymatycznej . Hydrolizowana próbka musi poddać się prawidłowej traktowania, takiego jak usunięcie reszt białka .
- Derywatyzacja: W celu poprawy wrażliwości analizy aminokwasów wykrywanie i charakterystyka selekcji separacji, derywatyzacja aminokwasów jest często wymagana . Istnieją dwa rodzaje pochodnych aminokwasów: pochodne kolumny i pochodne po kolumnie . powszechnie stosowane przedpiersiowe pochodne przedbrzeżne. (FMOC-CI), izotiocyjanian fenylowy (PITC), chlorek danzylu (danansyl-CI), 2, 4- dinitrofluorobenzen (FDNB), itp. .
- Wybór kolumny: Wybierz kolumnę odpowiednią do analizy aminokwasów, takiej jak kolumna Exchange Ion, kolumna C18, kolumna C8 itp. .
- Ustawienie warunków chromatograficznych: Ustaw odpowiednie warunki chromatograficzne, w tym faza mobilna, szybkość przepływu, program gradientowy itp. . Wspólne fazy mobilne obejmują bufory zawierające pary jonów, takie jak bufory formanowe .
- Analiza próbki: Próbka po hydrolizy i derywatyzacji jest wstrzykiwana do chromatografu do analizy . poprzez porównanie powierzchni piku i stężenie każdego aminokwasu w próbce na krzywej standardowej, zawartość aminokwasów w próbce można analizować ilościowo .}
- Przetwarzanie danych: Zgodnie z obszarem piku i danych stężenia uzyskanych z analizy obliczana jest zawartość każdego aminokwasu w próbce, a dane są przetwarzane, a wynik jest zgłaszany .
Istnieje wiele przykładów zastosowań w analizie aminokwasów, a kilka konkretnych przypadków wymieniono poniżej:
- Wykrywanie niezbędnych aminokwasów: Zastosowanie może wykryć zawartość niezbędnych aminokwasów, takich jak izoleucyna, leucyna, lizyna itp. . Te aminokwasy odgrywają istotną rolę w ludzkim ciele i są ważne dla utrzymywania aktywności i zdrowia .}
- Określenie aminokwasów w medycynie chińskiej: w analizie medycyny chińskiej jest ono powszechnie stosowane do określenia zawartości aminokwasów w medycynie chińskiej ., na przykład przy określaniu zawartości paeonifloriny w kolumnie Wuji Baifeng, kolumna z oktadecylosilanową żelem krzemionkowym, jako kompleler może być używana do separacji i ustalania innej amino. kwasy .
- Oznaczanie aminokwasów w żywności: Zawartość aminokwasów w żywności jest również jednym z ważnych obszarów zastosowania ., na przykład w określeniu nukleotydów w żywności niemowląt i produktach mlecznych, pięć nukleotydów w proszku mlecznym można izolować i określać za pomocą C 18- t odwróconej kolumny lub kolumny równoważnej. Aby określić zawartość aminokwasów w innych produktach spożywczych, co stanowi ważną podstawę do kontroli jakości żywności i oceny żywienia .
W analizie aminokwasów konieczne jest wybranie odpowiednich odczynników derywatyzacji i warunków derywatyzacji w celu poprawy czułości i dokładności wykrywania .
Wybór kolumny i ustawienie warunków chromatograficznych mają istotny wpływ na efekt separacji i należy go zoptymalizować zgodnie z konkretną próbką i potrzebami analitycznymi .
W procesie analizy należy zwrócić uwagę na warunki przygotowania i przechowywania próbek, aby uniknąć wpływu zanieczyszczenia i degradacji próbki na wyniki analizy .
Co to jest leczenie pochodne
Derywatyzacja jest ważną techniką wstępnej obróbkiKlasyczna chromatografia kolumn, który ma na celu poprawę wydajności wykrywania i efektu separacji analitów . Poniżej znajduje się szczegółowe wyjaśnienie procesu derywatyzacji:
|
► Cel leczenia pochodnego Oku |
|
|
|
► rodzaj leczenia pochodnego 1) Wyprowadzenie przedkolunnictwa: |
|
Pochodzenie po kolumnie ma zalety dobrej odtwarzalności i mniej wpływowych czynników, ale wymaga dodatkowych instrumentów i sprzętu . 1) Ulepszona czułość wykrywania: na przykład w analizie aminokwasów wprowadzenie łatwo wykrywalnych grup funkcjonalnych (takich jak fluorofory) poprzez derywatyzację przedkolumnową może zwiększyć siłę sygnału aminokwasów w detektorze, poprawiając w ten sposób wrażliwość wykrywania . |
|
Klasyczna chromatografia kolumn, podstawowa technika w naukach separacji, nadal ewoluuje z postępami materiałów i metodologii, zapewniając jej znaczenie zarówno w zastosowaniach badawczych, jak i przemysłowych .
Jednym obiecującym kierunkiem jest integracja nowatorskich faz stacjonarnych . innowacje w naukach materialnych doprowadziły do opracowania wysokowydajnych materiałów opakowaniowych o zwiększonej selektywności, stabilności i wydajności . Materiały te pozwalają na lepszą rozdzielczość i szybsze separacje, zaspokojenie rosnącego popytu na rosnące zapotrzebowanie na analiza wysokiego poziomu w branżach, takich jak farmaceutyka i biotechnologia {4} {4} {4} {4} {4} {4} {4} {4} {4} {4} {4} {4}
Ponadto coraz częściej łączy się to z zaawansowanymi technikami wykrywania, takimi jak spektrometria masowa, w celu poprawy wrażliwości i dokładności . Ta hybrydyzacja umożliwia bardziej kompleksową analizę złożonych mieszanin, rozszerzając zastosowanie techniki w polach, takich jak metabolomika i proteomika .}}}
Podsumowując, przyszłość polega na dostosowaniu do nowych materiałów, miniaturyzacji i integracji z najnowocześniejszymi metodami wykrywania, zapewniając jego dalszą użyteczność we współczesnych krajobrazach naukowych i przemysłowych .
Popularne Tagi: Klasyczna chromatografia kolumnowa, China klasyczna producenci chromatografii kolumnowej, dostawcy, fabryka
Wyślij zapytanie
